本发明涉及一种载脂蛋白B中与低密度脂蛋白结合域结合的多肽（RLT多肽）介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂及其制备方法，属于医药技术领域。该亚微乳剂是用注射用油、乳化剂、助乳化剂、抗氧剂、等渗调节剂、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺、RLT多肽和多西紫杉醇制备的肿瘤靶向亚微乳剂。多西紫杉醇的重量体积浓度范围为0.5～20mg/mL。本肿瘤靶向亚微乳粒径均匀，平均粒径为182nm。肿瘤靶向分子修饰多西紫杉醇亚微乳剂后显著提高了肿瘤靶向效率，增加药物在肿瘤组织的分布，降低其他正常的药物量。因此，RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂能提高药物的治疗效果，降低毒副作用。
1.一种RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，其特征在于：每毫升亚微乳剂中含有多西紫杉醇0.5～20mg、注射用植物油0.05～0.2xa0g、乳化剂8～24xa0mg、助乳化剂0～20xa0mg、抗氧化剂0.2mg、十八胺0.6mg、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺0.1～1.0mg、RLT多肽0.08～0.8xa0mg、等渗调节剂22.5xa0mg；制备方法包括以下步骤：xa0（1）制备油相：在55～75℃条件下，将乳化剂、多西紫杉醇、抗氧剂维生素E、十八胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺和注射用植物油加入到无水乙醇中溶解；在30～45℃下，减压除去乙醇，加热至55～75℃，搅拌均匀，形成油相；xa0（2）制备水相：在55～75℃条件下，将助乳化剂、甘油加入注射用水中，搅拌均匀，形成水相；（3）制备初乳：在温度保持为55～75℃恒温并不断搅拌的前提下，将油相缓缓注入到水相，快速搅拌，调节pH值7.2～7.4，定容，在匀质速度6000～12000rpm下均质2～15分钟，制得初乳；（4）终乳的制备：将制得的初乳过微射流仪，在3000～18000xa0PSI的压力下，匀质6～20次；制得多西紫杉醇亚微乳剂；（5）RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的制备：将RLT多肽加入到多西紫杉醇亚微乳中37℃搅拌孵育15~60分钟，过0.22μm的滤膜即可制得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂。
2.根据权利要求1所述的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，其特征在于：亚微乳剂分散相的平均粒径＜200nm。
3.根据权利要求1或2所述的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，其特征在于：所述的注射用植物油选自大豆油、茶油、麻油、红花油、橄榄油中的一种或它们当中两种或两种以上物质的混合物。
4.根据权利要求3所述的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，其特征在于：所述的乳化剂选自蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、氢化大豆磷脂、合成磷脂中的一种或一种以上。
5.根据权利要求1或2或4所述的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，其特征在于：所述的助乳化剂选自泊洛沙姆、聚乙二醇硬脂酸酯的一种或两种物质的混合物。
6.根据权利要求1所述的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，其特征在于：所述的RLT多肽为半胱氨酸-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸，HS-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸，谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸-SH，谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸-半胱氨酸中的一种。
7.根据权利要求1或2或6所述的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，其特征在于：所述的抗氧化剂为维生素E。
8.根据权利要求7所述的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，其特征在于：所述的等渗调节剂为甘油。技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及将抗癌药多西紫杉醇用适当药用辅料制备成RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，本发明还涉及该制剂的制备方法。
背景技术
多西紫杉醇（Docetaxel）属于紫杉烷类抗肿瘤药，主要干扰细胞有丝分裂及分裂期间所需的微管网络起到抗肿瘤效果，其不良反应主要表现在过敏反应、血小板减少、一过性心动过速、低血压、神经毒性反应、胃肠道反应以及皮肤毒性反应等。多西紫杉醇水溶性小，市售的泰索帝采用吐温-80增溶、乙醇助溶，会造成溶血反应，安全性差。如何降低其副作用、提高临床疗效已成为亟待解决的问题。公开专利200510084055.6和200610012102.0将多西紫杉醇制备成亚微乳剂，提高了多西紫杉醇的含量和稳定性，降低了含油量并增加其对肿瘤组织的靶向性。多西紫杉醇传统亚微乳剂相比普通注射液的优越性得到证实。但两专利公开的多西紫杉醇亚微乳剂属于被动靶向制剂，静脉注后被巨噬细胞吞噬，富集于肝、肾及脾部位，由于肿瘤及其它组织分布很少的巨噬细胞系统，这样不利于肿瘤组织摄取药物，靶向效率低，药物对其他正常器官的毒性依然较大。因此肿瘤靶向性需要进一步提高。低密度脂蛋白受体(LDLR)是一种细胞膜糖蛋白，主要功能是结合携带胆固醇酯的低密度脂蛋白(LDL)。研究发现，前列腺癌、恶性脑瘤等癌细胞超表达LDLR。因此，LDLR可作为抗癌药物靶向给药的分子靶点。载脂蛋白B100（apoB）是一种糖蛋白，其中的9个氨基酸残基（3359–3367）与LDLR的功能域相结合。基于此，设计了含与LDLR功能域相结合的RLT多肽并采用固相合成法合成RLT多肽。将合成的RLT多肽修饰亚微乳剂乳滴表面，使其在分子水平识别高表达LDLR的肿瘤细胞。本发明制备的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂为主动靶向肿瘤制剂，其可显著提高多西紫杉醇的肿瘤靶向性。
发明内容
xa0xa0xa0xa0本发明的目的在于克服现有注射乳剂和脂肪乳剂的缺点，提供一种新的具有主动靶向肿瘤的多西紫杉醇亚微乳剂剂，即提供一种载脂蛋白B中与低密度脂蛋白结合域结合的多肽（RLT多肽），该制剂疗效优于现有水针剂性，同时具有良好的药物稳定性及主动靶向肿瘤的特性。本发明的目的是通过以下技术方案实现的：本发明的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，每毫升亚微乳中含有多西紫杉醇0.5～20mg、注射用植物油50～200xa0mg、乳化剂8～24xa0mg、助乳化剂1～20xa0mg、抗氧剂维生素Exa00.2mg、十八胺0.6mg、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺0.1～1.0mg、RLT多肽0.08～0.8xa0mg和等渗调节剂甘油22.5xa0mg。本发明的亚微乳分散相的平均粒径＜200nm。本发明中所用的注射用植物油选自大豆油、茶油、麻油、红花油、橄榄油中的一种或它们当中两种或两种以上物质的混合物。所用的乳化剂选自蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、氢化大豆磷脂、合成磷脂中的一种或一种以上。所用的助乳化剂选自泊洛沙姆、聚乙二醇硬脂酸酯一种或两种物质的混合物。所述的RLT多肽为半胱氨酸-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸，HS-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸，谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸-SH，谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸-半胱氨酸中的一种。所用的抗氧化剂和等渗调节剂分别为维生素E和甘油。本发明提供的上述RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的制备方法，包括下列步骤：（1）制备油相：在55～75℃条件下，将乳化剂、多西紫杉醇、抗氧剂维生素E、十八胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺和注射用植物油加入到无水乙醇中溶解；在30～45℃下，减压除去乙醇，加热至55～75℃，搅拌均匀，形成油相；xa0（2）制备水相：在55～75℃条件下，将助乳化剂、甘油等加入注射用水中，搅拌均匀，形成水相；（3）制备初乳：在温度保持为55～75℃恒温并不断搅拌的前提下，将油相缓缓注入到水相，快速搅拌，调节pH值7.2～7.4，定容，在匀质速度6000～12000rpm下均质2～15分钟，制得初乳；（4）终乳的制备：将制得的初乳过微射流仪，在3000～18000xa0PSI的压力下，匀质6～20次；制得多西紫杉醇亚微乳；（5）RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的制备：将RLT多肽加入到多西紫杉醇亚微乳剂中37℃搅拌孵育15～60分钟，过0.22μm的滤膜即可制得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳。本发明的优点是：由于本发明将乳化剂、注射用油和多西紫杉醇制备成亚微乳剂，用助乳化剂、稳定剂、等渗调节剂修饰亚微乳的脂质材料，增加多西紫杉醇的溶解度。从而延长药物在体内的作用时间，具有缓控释作用。RLT多肽修饰亚微乳剂，使其具有良好的主动靶向肿瘤特性，提高了药物的治疗效果，降低毒副作用；本发明采用的制备工艺简单、载药量高、质量可控，适合工业化生产。
附图说明
图1xa0固相合成法制备的RLT多肽质谱图。图2xa0RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳与其它两种乳剂在各个组织中的Re。图3xa0RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳与其它两种乳剂在各个组织中的Re。图4xa0RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳与其它两种乳剂的肿瘤靶向效率。图5xa0RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳的肿瘤相对靶向效率。
具体实施方式
本发明所用的RLT多肽介为固相合成法制备，首先使用氯甲基树脂作载体，再用氢化钠溶液及2-羟甲基-3,4-二氢吡喃在二甲乙酰胺中室温与氯甲基树脂反应，得到3,4-二氢吡喃羟甲基树脂，然后进一步合成RLT肽，合成RLT肽过程中首先将3,4-二氢吡喃羟甲基树脂加保护基，即在对甲苯磺酸吡啶盐作用下将芴甲氧羰基-0-叔丁醚苏氨醇连到3,4-二氢吡喃羟甲基树脂上去，将3,4-二氢吡喃羟甲基树脂加入到新蒸的THF中浸润，然后按照Fmoc/tBu固相多肽合成的方法将氨基酸逐个连上，最后用三氯醋酸：水：苯甲硫醚：乙二硫醇的混合溶液将肽从树脂上切下，得到的粗品，经制备HPLC纯化冷冻得到RLT肽。下面结合实施例对本发明作详细说明，但本发明的保护范围不局限于此。实施例11.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的原料及原料配比如表１所示。所述的RLT多肽为谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸-半胱氨酸。2.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的方法如下：（1）制备油相：在55℃条件下，将乳化剂、多西紫杉醇、抗氧剂维生素E、十八胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺和注射用植物油加入到无水乙醇中溶解；在30℃下，减压除去乙醇，加热至55℃，搅拌均匀，形成油相；（2）制备水相：在55℃条件下，将助乳化剂、甘油等加入注射用水中，搅拌均匀，形成水相；（3）制备初乳：在温度保持为55℃恒温并不断搅拌的前提下，将油相缓缓注入到水相，快速搅拌，调节pH值7.2，定容，在匀质速度6000rpm下均质15min，制得初乳；（4）终乳的制备：将制得的初乳过微射流仪，在3000xa0PSI的压力下，匀质20次；制得多西紫杉醇亚微乳剂；（5）将RLT多肽加入到多西紫杉醇亚微乳剂中37℃搅拌孵育15分钟，过0.22μm的滤膜即可制得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂。实施例21.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的原料及原料配比如表１所示。所述的RLT多肽为谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸-SH。2.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的方法如下：（1）制备油相：在60℃条件下，将乳化剂、多西紫杉醇、抗氧剂维生素E、十八胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺和注射用植物油加入到无水乙醇中溶解；在35℃下，减压除去乙醇，加热至60℃，搅拌均匀，形成油相；（2）制备水相：在60℃条件下，将助乳化剂、甘油等加入注射用水中，搅拌均匀，形成水相；（3）制备初乳：在温度保持为60℃恒温并不断搅拌的前提下，将油相缓缓注入到水相，快速搅拌，调节pH值7.2，定容，在匀质速度8000rpm下均质12min，制得初乳；（4）终乳的制备：将制得的初乳过微射流仪，在6000xa0PSI的压力下，匀质16次；制得多西紫杉醇亚微乳；（5）将RLT多肽加入到多西紫杉醇亚微乳剂中37℃搅拌孵育30分钟，过0.22μm的滤膜即可制得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂。实施例31.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的原料及原料配比如表１所示。所述的RLT多肽为半胱氨酸-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸。2.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的方法如下：（1）制备油相：在65℃条件下，将乳化剂、多西紫杉醇、抗氧剂维生素E、十八胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺和注射用植物油加入到无水乙醇中溶解；在35℃下，减压除去乙醇，加热至65℃，搅拌均匀，形成油相；（2）制备水相：在65℃条件下，将助乳化剂、甘油等加入注射用水中，搅拌均匀，形成水相；（3）制备初乳：在温度保持为65℃恒温并不断搅拌的前提下，将油相缓缓注入到水相，快速搅拌，调节pH值7.4，定容，在匀质速度10000rpm下均质10min，制得初乳；（4）终乳的制备：将制得的初乳过微射流仪，在8000xa0PSI的压力下，匀质12次；制得多西紫杉醇亚微乳；（5）将RLT多肽加入到多西紫杉醇亚微乳剂中37℃搅拌孵育30分钟，过0.22μm的滤膜即可制得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂。实施例41.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的原料及原料配比如表１所示。所述的RLT多肽为HS-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸。2.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的方法如下：（1）制备油相：在70℃条件下，将乳化剂、多西紫杉醇、抗氧剂维生素E、十八胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺和注射用植物油加入到无水乙醇中溶解；在35℃下，减压除去乙醇，加热至70℃，搅拌均匀，形成油相；（2）制备水相：在70℃条件下，将助乳化剂、甘油等加入注射用水中，搅拌均匀，形成水相；（3）制备初乳：在温度保持为70℃恒温并不断搅拌的前提下，将油相缓缓注入到水相，快速搅拌，调节pH值7.4，定容，在匀质速度700rpm下均质8min，制得初乳；（4）终乳的制备：将制得的初乳过微射流仪，在12000xa0PSI的压力下，匀质10次；多西紫杉醇亚微乳；（5）将RLT多肽加入到多西紫杉醇亚微乳剂中37℃搅拌孵育45分钟，过0.22μm的滤膜即可制得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂。实施例51.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的原料及原料配比如表１所示。所述的RLT多肽为半胱氨酸-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸。2.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的方法如下：（1）制备油相：在75℃条件下，将乳化剂、多西紫杉醇、抗氧剂维生素E、十八胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺和注射用植物油加入到无水乙醇中溶解；在35℃下，减压除去乙醇，加热至75℃，搅拌均匀，形成油相；（2）制备水相：在75℃条件下，将助乳化剂、甘油等加入注射用水中，搅拌均匀，形成水相；（3）制备初乳：在温度保持为75℃恒温并不断搅拌的前提下，将油相缓缓注入到水相，快速搅拌，调节pH值7.4，定容，在匀质速度11000rpm下均质2～5min，制得初乳；（4）终乳的制备：将制得的初乳过微射流仪，在16000xa0PSI的压力下，匀质8次；制得多西紫杉醇亚微乳；（5）将RLT多肽加入到多西紫杉醇亚微乳剂中37℃搅拌孵育45分钟，过0.22μm的滤膜即可制得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂。实施例61.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的原料及原料配比如表１所示。所述的RLT多肽为半胱氨酸-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸。2.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的方法如下：（1）制备油相：在75℃条件下，将乳化剂、多西紫杉醇、抗氧剂维生素E、十八胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-马来酰亚胺和注射用植物油加入到无水乙醇中溶解；在35℃下，减压除去乙醇，加热至75℃，搅拌均匀，形成油相；（2）制备水相：在75℃条件下，将助乳化剂、甘油等加入注射用水中，搅拌均匀，形成水相；（3）制备初乳：在温度保持为75℃恒温并不断搅拌的前提下，将油相缓缓注入到水相，快速搅拌，调节pH值7.4，定容，在匀质速度12000rpm下均质2min，制得初乳；（4）终乳的制备：将制得的初乳过微射流仪，在18000xa0PSI的压力下，匀质6次；制得多西紫杉醇亚微乳；（5）将RLT多肽加入到多西紫杉醇亚微乳剂中37℃搅拌孵育60分钟，过0.22μm的滤膜即可制得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂。实施例７～161.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的原料及原料配比如表１所示。所述的RLT多肽为半胱氨酸-谷氨酸-赖氨酸-亮氨酸-赖氨酸-谷氨酸-丙氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-亮氨酸-苏氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸-甘氨酸-亮氨酸-赖氨酸-亮氨酸-丙氨酸。2.制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的方法采用上述实施例１～６中的制备方法。表１u3000各实施例中制备RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的及原料配比ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="544"/>ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="544"/>xa0上述实施例中所用的抗氧剂还可以采用市售的其它类型的抗氧化剂，等渗调节剂可以采用市售的其它类型的等渗调节剂。以实施例3制备的RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂为例，研究结果如下：采用质谱仪检测固相合成法制备的RLT多肽见图1。采用Nano-ZS90型激光纳米粒径分析仪测定乳滴粒径和zeta电位。结果RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的乳滴分布均匀，平均粒径为182.2±10nm，平均zeta电位为39.62±2.41mV。药物含量测定：精密吸取20μLRLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂于5mL容量瓶中，加入甲醇超声破坏并稀释至刻度，用HPLC测定，得到的峰面积代入标准曲线计算其药物含量。包封率测定：精密吸取0.2mLRLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂置于超滤管中，10000r/min，离心20min，尽量使水相全部离心至超滤管外面，高效液相测定超滤液中药物的含量，利用下式计算包封率。ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="496"/>xa0结果测得RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂中多西紫杉醇含量为1.410±0.14mg/ml，包封率>98%。多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的肿瘤靶向性评价：将27只荷S180瘤小鼠随机分为三组，每组9只，三组小鼠分别尾静脉注射多西紫杉醇传统亚微乳剂、多西紫杉醇阳离子亚微乳剂和RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂，每个时间点3只小鼠，给药后0.5h、1h、3h三个时间点时从各组中取出小鼠，解剖分离得到心、肝、脾、肺、肾、脑和肿瘤，用生理盐水冲洗各个组织后匀浆，采用HPLC测定个组织中药物含量，并计算其AUC和C_max。对AUC和C_max进行处理，采用峰浓度比、相对摄取率、靶向效率及相对靶向效率评价制剂的肿瘤靶向性：峰浓度比：Ce=(C_max)_C/(C_max)_Bxa0orxa0A；相对摄取率：Re=xa0(AUC_i)_C/(AUC_i)_{xa0Bxa0orxa0A}靶向效率：Te=(AUC_i)_靶/(AUC_i)_非靶；相对靶向效率：R_Te=(Te)_C/(Te)_{xa0Bxa0orxa0Axa0}上式中AUC是第i个组织的药时曲线下面积；下标A、B和C分别表示多西紫杉醇传统亚微乳剂、多西紫杉醇阳离子亚微乳剂和RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂。图2为xa0RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳与其它两种乳剂在各个组织中的Re，图3xa0是RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳与其它两种乳剂在各个组织中的Re。由图2和图3可以看出：在肿瘤组织中，RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂与其它两种制剂相比，Re和Ce均大于1，说明其在肿瘤组织中的分布高于其它两种亚微乳剂，肿瘤靶向性比较好。图4是xa0RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳与其它两种乳剂的肿瘤靶向效率，由图4可以看出：若将心、肝、脾、肺及肾作为非靶组织，三种制剂的肿瘤靶向性不明显（Te<1），各个组织的靶向效率大小依次为：RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂>传统亚微乳剂。图5xa0RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳的肿瘤相对靶向效率，由图5可以看出：若将心、肝、脾、肺、肾及脑作为非靶组织，RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂与其它两种亚微乳剂的相对靶向效率：R_Te>1，说明RLT多肽介导的多西紫杉醇肿瘤靶向亚微乳剂的靶向性比其它两种制剂好，尤其与传统亚微乳剂相比其具有更佳的肿瘤靶向性。